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遼寧省海洋水產(chǎn)科學研究院、遼寧省農(nóng)業(yè)科學院、大連生物技術(shù)研究所遼寧省蠶業(yè)科學研究所聯(lián)合發(fā)表磁珠法DNA提取論文如下：

李佩佩，等. 高通量DNA快速提取方法及其在柞蠶微孢子蟲分子診斷中的應用, 蠶業(yè)科學, 2019年05期

摘要：針對柞蠶微孢子蟲分子檢測受限于繁瑣的DNA提取而局限于實驗室使用的瓶頸問題,以成本較低的堿裂解法結(jié)合磁珠抽提,建立了一種全程在96孔板上使用排槍操作的高通量DNA提取方法(HT提取),對比HT-凍融法和HT-SDS法2種裂解方法獲得的DNA在常規(guī)PCR與熒光定量PCR(qPCR)中的檢測下限,并進行微粒子病篩查的應用。結(jié)果表明,HT提取法與傳統(tǒng)方法相比,無繁瑣預處理,操作快速、通量高,污染低、抗干擾、提取DNA品質(zhì)好,主要耗材能重復使用,可自動化,人力物力成本較低;HT-SDS法具有更穩(wěn)定的裂解效果,獲得的DNA用于常規(guī)PCR、qPCR檢測下限可達45和0045個/μL;HT-凍融法在常規(guī)PCR與qPCR中的檢測下限為45和045個/μL,而傳統(tǒng)抽提方法的常規(guī)PCR檢測下限僅為110個/μL。結(jié)合HT-SDS法和qPCR,對3 000個樣品進行微粒子病篩查,結(jié)果顯示,其檢測靈敏度顯著高于現(xiàn)行鏡檢技術(shù),最高高出近11倍,且對低帶毒品種優(yōu)勢尤為顯著,有望實現(xiàn)在柞蠶種繭微粒子病檢疫及柞蠶種質(zhì)資源保護中的應用,促進柞蠶業(yè)發(fā)展。

基金：遼寧省科學事業(yè)公益研究基金項目(No.20180013)； 大連市高層次人才創(chuàng)新支持計劃項目(No.2018RQ59)； 遼寧省自然科學基金指導項目(No.20170540512,20170540513,201602418)； 遼寧省重大科技攻關(guān)項目(No.2014209001)；

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