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抗原/抗體法快速檢測新型冠狀病毒膠體金試紙原理

2020-4-11 13:44:46點擊:



上面介紹的是檢測抗原的 雙抗體夾心法,另外一種是檢測患者血液里特異性針對新型冠狀病毒的IgM抗體。這種就是IgM捕捉法的膠體金試紙。

首先要了解人體抗體應答的規(guī)律——


人體在接觸外來抗原的時候,最早產生的抗體是IgM(Ig就是Immunoglobulin/免疫球蛋白的意思),但是也需要是機體感受病原刺激大約一周以后才出現,所以在檢測時間窗口上來說,不如核酸檢測來的快。

IgM實際上就是B淋巴細胞表面的B細胞受體(BCR)的分泌形式,這是在人體發(fā)育成熟的過程中預先備好的巡邏兵,但是相當于是新兵蛋子,還沒真正見過敵人。IgM在識別抗原以后,產生這些IgM的B細胞會進入淋巴結,在這里被已經分析好敵情的抗原提呈細胞APC(主要是樹突狀細胞DC)和輔助性T淋巴細胞的幫助訓練下,殺敵本領有的質的飛躍,B細胞自己也有了覺悟,出現了進化,相當于Civ里一級戰(zhàn)士變成了6級戰(zhàn)士,進化的結果就是從B細胞分化為漿細胞,漿細胞可以大量分泌抗體,而且這些抗體的親和力比IgM會高很多,這就是IgG。IgG會在機體內存在很長時間,有的甚至可以存在幾十年。但是IgM只在病原體剛來的時候會出現,持續(xù)時間大約一周,所以,可以用IgM來反應機體是不是處于急性感染狀態(tài)。

在了解機體抗體應答規(guī)律之后,我們就知道了,如果能檢測到人體血液里存在針對新型冠狀病毒的IgM抗體,那么就可以下臨床診斷了。


那IgM捕捉法的膠體金試紙的原理也就很好理解了。

試紙的布局還是一樣的,只不過每一處的東西不一樣了——

樣品墊上滴加的是血液樣本(血清),這里面可能有針對新型冠狀病毒的IgM抗體,在結合墊處預留的金標的抗原,而不是金標的抗體。這個抗原就是新型冠狀病毒的一個蛋白(體外重組表達出來的)。這樣IgM就會結合這個抗原,并且把膠體金帶上了。檢測線的位置放的是針對人IgM的抗體,這樣,如果血液樣本里有IgM,就會被這個地方的抗體截留一部分,但是如果這些IgM不能識別結合墊處的金標冠狀病毒抗原,那么檢測線也不會顯色。所以這是檢測線的原理。


對于質控線來說,這里留的是針對結合墊處的金標抗原的實驗室制備的抗體,所以,不管樣本里有沒有特異性的IgM,只要加了流動介質,結合墊處的金標抗原都會被這個地方所捕獲,也就是質控線一定會顯色。 那這個質控就和上面一樣簡單了,大約15分鐘,就能根據兩條線的顯色情況下判斷了。

原理介紹完了,膠體金的最大優(yōu)點就是快速,方便。

但是缺點也很明顯——通量不高,另外試紙的準確性高度依賴于抗體的特異性,如果抗體質量不好,那很容易有交叉反應,造成誤判。另外,IgM產生的時間要晚于病毒復制的時間,所以檢測窗口也不如核酸檢測。


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