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PuriMagTM DetergentOut磁珠(高蛋白和肽回收率)可去除蛋白質(zhì)/肽濃度低(1~ 100μg/mL)樣品中常用的離子、非離子和兩性離子表面活性劑。洗滌劑和表面活性劑用于增溶、穩(wěn)定和解聚蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)復(fù)合物,然而,去污劑會(huì)干擾下游分析,例如 ELISA、等電聚焦和質(zhì)譜 (MS)。PuriMagTMDetergentOut磁珠在表面活性劑濃度(0.5-1)下去除效率為95%,能夠回收和表征低豐度蛋白質(zhì)。
產(chǎn)品信息
體積:5mL
濃度: 50% 漿液 (如,5mL 沉降磁珠等于 10mL 的50% 漿液)
保存溶液: 0.15M NaCl 和0.05% NaN3
注意事項(xiàng)
? 必須將樣品直接添加到樹(shù)脂中,以去除去污劑,并有效回收蛋白質(zhì)/肽。
? 使用一份樣品對(duì)一份沉降樹(shù)脂(例如,50μL 樣品對(duì) 50μL 沉降磁珠)去除 SDS、脫氧膽酸鈉、Triton? X-100、Triton X-114 和 NP-40。
? 使用一份樣品對(duì)兩份沉降樹(shù)脂(例如,50μL 樣品對(duì) 100μL 沉降樹(shù)脂)去除 CHAPS、辛基葡糖苷和辛基硫代葡糖苷。
表1. 磁珠最大去除表活量對(duì)照表
表面活性劑
最大去除濃度 (%)
SDS
1
Sodium deoxycholate
Triton X-100
Triton X-114
0.5
NP 40
0.75
CHAPS*
Octyl glucoside*
Octyl thioglucoside*
*使用樣本體積1-2倍的沉降磁珠
平衡液
使用AMBIC, PBS, MES, MOPS, Tris or carbonate-bicarbonate at pH 5 to 10. 不要使用含有機(jī)溶劑的緩沖液。
去除表面活性劑操作流程
1. 使用前,徹底混勻磁珠。
2. 將200μl磁珠(沉降體積100μl)置于1.5ml離心管中。
3. 將試管置于磁力架上,收集磁珠并丟棄上清液。
4. 使用平衡液(每次400μl)上下吹打洗滌磁珠1分鐘,共洗滌三次,收集磁珠并丟棄上清液。
5. 將含表面活性劑的蛋白或多肽樣品100加入μl磁珠中,常溫孵育10分鐘。
6. 磁分離,將上清轉(zhuǎn)移到新的離心管,即為純化后的蛋白或多肽。
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