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一、概述
Magarose-DEAE是一種弱陰離子交換磁珠，具有快速的磁響應(yīng)性、豐富的離子交換能力和極高蛋白結(jié)合能力。離子交換配基為二乙氨乙基（diethylaminoethyl，DEAE），該配基在pH 3-12的工作范圍內(nèi)仍然能夠保持穩(wěn)定的高蛋白結(jié)合能力。Magarose-DEAE磁珠無需對粗蛋白樣品進行預(yù)處理（如：反復(fù)繁瑣的離心，費時費力的過濾操作），此外，無需控制流速及柱壓，不需要昂貴的層析設(shè)備。對熟練的操作者，在短時間內(nèi)就能完成高純度目的蛋白的提取，且能輕松實現(xiàn)多個樣品的平行處理，實現(xiàn)高通量的蛋白純化。
二、產(chǎn)品特性
產(chǎn)品名稱
Magarose-DEAE
貨號
PMAG006
磁珠濃度
25%（v/v）in 20% 乙醇
總離子能力
110~170 μmol /ml磁珠
介質(zhì)
6%交聯(lián)磁性瓊脂糖
粒徑
20-45μm
配體結(jié)合
~110 mg BSA /ml磁珠
保存
2~8℃保存一年
三、使用方法
1. 產(chǎn)品優(yōu)勢
w 磁響應(yīng)速度快，減少操作時間；
w 磁珠具良好分散性和重懸性，提高操作的便捷性；
w 配基具有良好的物理化學(xué)穩(wěn)定性，提高了實驗結(jié)果的可靠性及可重復(fù)性；
2. 操作流程（以純化含BSA蛋白樣品為例）
1) 磁珠預(yù)處理（平衡）：將磁珠漩渦振蕩30 s，充分重懸；取一定量的25 %（v/v）磁珠懸液置于50 mL離心管中。磁分離，棄上清液，加入20 mL 平衡緩沖液洗滌磁珠3次，每次垂直混合2 min。
注：為獲得目標蛋白的最大回收率，實驗者需加入過量磁珠，一般大于蛋白結(jié)合量的20%即可。對于含較低豐度目標蛋白的樣品中，磁珠對目標蛋白的回收率會有所降低，因此要繼續(xù)增大磁珠的用量；
2) 蛋白吸附：將預(yù)處理的磁珠加入含BSA蛋白的樣品溶液中，漩渦振蕩30 s，置于垂直混合儀混勻30~60 min，使樣品和磁珠充分接觸并吸附，然后進行磁分離，移棄上清液。
注：為更有效的吸附結(jié)合物質(zhì)，平衡緩沖液最好含較低離子強度，選擇pH值應(yīng)至少與目標蛋白等電點相差一個pH單位，選定鹽緩沖液pH波動在0.5 pH以內(nèi)。目標蛋白與磁珠吸附時間與蛋白本身屬性有關(guān)。
3) 磁珠洗滌：加入20 mL的平衡緩沖液，漩渦振蕩重懸磁珠30 s后磁分離，移棄上清；該操作重復(fù)3次。
4) 蛋白洗脫：在上述完成磁珠洗滌的離心管中加入適量洗脫液進行蛋白洗脫。迅速重懸磁珠，然后將離心管置于垂直混合儀混勻10~15 min后磁性分離，收集上清液至新的離心管中。洗脫方式主要有高鹽濃度洗脫（含1-2 M的NaCl的平衡緩沖液）和低pH洗脫（選擇低于目標蛋白等電點的pH范圍即可）兩種。
5) 磁珠再生：一般用2 M NaCl溶液洗滌3~5次，然后用平衡緩沖液進行再平衡。磁珠多次使用后有沉淀蛋白、強疏水性蛋白、脂蛋白等雜質(zhì)非特異性吸附到磁珠上，為保證磁珠使用效率，建議在位清洗（CIP）。
6) 在位清洗（CIP）：依次采用 1.0 M NaOH、70%乙醇或30%異丙醇、純水洗滌磁珠2次；最后加入20%乙醇重懸磁珠，置于2~8℃保存。
3. 注意事項
1) 本產(chǎn)品不宜冷凍、干燥或離心操作。冷凍、干燥和離心等操作會引起磁珠團聚，不易于重懸和分散，并且影響磁珠表面功能基團的化學(xué)活性。
2) 使用本產(chǎn)品前，務(wù)必使磁珠保持均勻的懸浮狀態(tài)。
3) 使用過程中可根據(jù)需求，用純化水或緩沖液磁吸洗滌磁珠 2~3次，以去除保存液中乙醇。
4) 本產(chǎn)品需與磁性分離設(shè)備配套使用。
5) 鹽濃度與pH值均會影響特異性蛋白的結(jié)合與洗脫，客戶需自行摸索不同蛋白的結(jié)合和洗脫條件，以保證蛋白純化量和純度。
本產(chǎn)品僅供研究使用！
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