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1. 概述
PuriMag G-Biotin是生物素偶聯(lián)的磁性納米顆粒,用于磁性分離抗生物素蛋白、親和素或鏈霉親和素標(biāo)記的組分。磁珠具有大的表面積和高捕獲效率。
2. 存儲緩沖液
Tris緩沖液,pH7.4,加入蛋白質(zhì)和防腐劑。
3. 儲存和穩(wěn)定性
PuriMag G-Biotin磁珠應(yīng)儲存在4-8℃。使用前將試劑達(dá)到室溫(20-25℃),有效期一年。不要凍結(jié),干燥或離心珠子,因?yàn)樗鼈兛赡芫奂瘜?dǎo)致活性喪失。
4. 測試原理
生物素磁珠與鏈霉親和素標(biāo)記的溶液一起溫育,然后用磁鐵分離。從磁珠中洗去未結(jié)合物質(zhì)后,使用洗脫緩沖液將結(jié)合的鏈霉親和素從磁珠上洗脫下來。然后將磁珠從洗脫液中磁性分離,手動除去溶液。
5. 產(chǎn)品特點(diǎn)
磁珠平均直徑:?200 nm
珠子濃度:10毫克/毫升
結(jié)合能力:≥30μg鏈霉親和素/ mg磁珠
A. 提供的材料
生物素磁珠,5毫克/毫升
B. 其他材料(未提供)
1) 結(jié)合/清洗緩沖液:TBS-0.05%吐溫20
2) 洗脫緩沖液:8M鹽酸胍,pH 1.5
C. 分離程序
1. 吸取50μL(0.5mg)磁珠,每管加入1mL結(jié)合緩沖液洗滌磁珠。
2. 磁力分離2分鐘或至上清液澄清。
3. 吸棄上清液。加入1mL結(jié)合緩沖液再洗滌一次。
4. 重復(fù)步驟2.取出并丟棄上清液。
5. 加入450μL結(jié)合緩沖液重懸磁珠。
6. 將50μL血清或細(xì)胞培養(yǎng)上清液加入磁珠中。
注意:樣本量可以根據(jù)用戶偏好進(jìn)行修改。如果樣品上清液體積<500μL,用結(jié)合緩沖液稀釋至終濃度為500μL。
7. 使用旋渦或旋轉(zhuǎn)器輕輕混合30分鐘。
8. 使用磁力分離器磁力分離2分鐘或至上清液澄清。
9. 去除并丟棄上清液。
10. 加入500μL結(jié)合緩沖液洗滌磁珠,并除去未結(jié)合的蛋白。
11. 再次重復(fù)步驟8和9。除去上清液。
12. 將100μL洗脫緩沖液加入磁珠中并充分混合。
13. 在室溫下孵育10分鐘,偶爾溫和攪拌或渦旋。
14. 將洗脫的樣品脫鹽或透析以轉(zhuǎn)移到合適的緩沖液中。
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