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預(yù)期用途
PuriMagTM WCX富集試劑盒（基于弱陽離子交換色譜法）是為在 MALDI-TOF 質(zhì)譜分析之前基于離子交換相互作用從生物樣品中富集蛋白質(zhì)和肽而開發(fā)的。
產(chǎn)品信息
PuriMagTM WCX：10 mg/ml×1ml，存儲(chǔ)于 20%乙醇溶液中。 產(chǎn)品應(yīng)小心儲(chǔ)存和處理，以避免污染。
產(chǎn)品在常溫下運(yùn)輸。我們建議到貨后將試劑盒存放在 2 - 8°C 環(huán)境中。請勿冷凍！
WCX 緩沖液
Binding buffer (BB): 0.05 M Ammonium Acetate (AmAc), pH 4;
Washing buffer (WB): water (HPLC grade);
Elution buffer (EB)：1% TFA in water;
推薦的生物標(biāo)志物富集程序
通常，我們推薦以下樣品制備方案，但根據(jù)樣品的種類和應(yīng)用，可能需要調(diào)整此方案。為此，可以改變不同的參數(shù)（例如，使用的磁珠量、樣品和結(jié)合溶液的體積）。
結(jié)合樣品到磁珠
1. 將磁珠在渦旋裝置上充分混合 1 分鐘。
2. 將10 μl BB 和 20-40 μl 的WCX 磁珠轉(zhuǎn)移到標(biāo)準(zhǔn)薄壁 PCR 管中，并上下吹打混合。
10 μL BB
20-40 μL Beads
3. 向溶液中加入5μl血清，上下移液5次，充分混合。
5 μL Sample
4. 孵育 5 分鐘。
5 Min
5. 將試管放入磁力架上，將磁珠收集在試管壁上1分鐘。上清液應(yīng)澄清。
1 Min
6. 使用移液管小心移除上清液。避免吸頭與磁珠接觸，并注意不要取出磁珠。
洗滌結(jié)合到磁珠上的樣品
7. 向試管中加入100μl的WB。
100 μL WB
8. 在磁力架中來回移動(dòng)管子十次，注意磁珠的運(yùn)動(dòng)。
9. 將磁珠收集在管壁上 1 分鐘。
10. 使用移液管小心地去除上清液。
11. 重復(fù)步驟 7-10 兩次。
從磁珠上的洗脫樣品
12. 加入5μl的EB，通過上下集中移液10次來分散管壁上的磁珠。
5 μL EB
13. 將磁珠收集在管壁上 2 分鐘。
2 Min
14. 將透明的上清液轉(zhuǎn)移到新鮮的試管中。
15. 繼續(xù)執(zhí)行如下所述的適當(dāng)MALDI-TOF靶標(biāo)制備方案或適當(dāng)方法儲(chǔ)存樣品。
應(yīng)用文獻(xiàn)：
1. Li, Z., Chen, J., Xu, B. et al. Correlation between small-cell lung cancer serum protein/peptides determined by matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry and chemotherapy efficacy. Clin Proteom 21, 35 (2024). https://doi.org/10.1186/s12014-024-09483-8
2. Li Liu, Hailing Liu, Kaili Zhu, Lingyu Zhang, Xiaomei Yin, Lin Han, Miaomiao Wang, Shanfeng Gao, Xuan Xiao, Juan Yang, Chen Huang, Yanping Huang, Proteome analysis reveals novel serum biomarkers for Henoch-Sch?nlein purpura in Chinese children, Journal of Proteomics, Volume 276, 2023, 104841, https://doi.org/10.1016/j.jprot.2023.104841.
3. Zhiying Hu, Man Zhang, Yaping Tian, Screening and analysis of small molecular peptides in urine of gestational diabetes mellitus, Clinica Chimica Acta, Volume 502, 2020, Pages 174-182, https://doi.org/10.1016/j.cca.2019.12.024.
4. L. Liu, J. Song, J. Li, N. Huang, J. Yang, S. Hu, R. Ma, W. Wang, Isoform 1 of Fibrinogen Alpha Chain Precursor is a Potential Biomarker for Steroid-Induced Osteonecrosis of the Femoral Head. Prot. Clin. Appl. 2020, 14, 1900099. https://doi.org/10.1002/prca.201900099
5. Zhu, Ning, Xing, Xiaoliang, Cao, Limei, Zhang, Yingjun, Zhang, Ti, Li, Zhen, Zou, Fen, Li, Qing, Study on the Diagnosis of Gastric Cancer by Magnetic Beads Extraction and Mass Spectrometry, BioMed Research International, 2020, 2743060, 8 pages, 2020. https://doi.org/10.1155/2020/2743060
6. S. Zhang, Z. Zhao, W. Duan, Z. li, Z. Nan, H. Du, M. Wang, J. Yang, C. Huang, The Influence of Blood Collection Tubes in Biomarkers’ Screening by Mass Spectrometry. Prot. Clin. Appl. 2020, 14, 1900113. https://doi.org/10.1002/prca.201900113
7. Han Z, Wen L. Development and validation of a decision tree classification model for the essential hypertension based on serum protein biomarkers. Ann Transl Med. 2022 Sep;10(18):970. doi: 10.21037/atm-22-3901. PMID: 36267793; PMCID: PMC9577809.
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