一、概述
兒茶酚胺( CAs)類物質(zhì)由腎上腺髓質(zhì)、交感神經(jīng)、副神經(jīng)節(jié)的嗜鉻細(xì)胞合成和分泌的單胺類神經(jīng)遞質(zhì)，是具有較強(qiáng)的生理學(xué)活性的內(nèi)源性物質(zhì)， 在大腦和神經(jīng)信號(hào)傳導(dǎo)中起著重要的作用。兒茶酚胺包括多巴胺（dopamine，DA）、去甲腎上腺素（norepinephrine，NE）和腎上腺素（epinephrine，E），一般稱為兒茶酚胺原型物質(zhì)，是存在于中樞和外周的神經(jīng)遞質(zhì)或激素，可作為多種神經(jīng)內(nèi)分泌和心血管疾病的篩查、診斷、治療和預(yù)后的重要生物標(biāo)志物。兒茶酚胺代謝物主要包括甲氧基腎上腺素（metanephrine，MN）、甲氧基去甲腎上腺素（normetanephrine，NMN）、3-甲氧基酪胺（3-methoxytyramine，3-MT）、高香草酸（homovanillic acid，HVA）和香草扁桃酸（vanillylmandelic acid，VMA），其與兒茶酚胺原型物質(zhì)聯(lián)合測量時(shí)，可提供疾病發(fā)展和治療效果的個(gè)性化信息。
兒茶酚胺及代謝產(chǎn)物濃度測定是嗜鉻細(xì)胞瘤和副神經(jīng)節(jié)瘤的重要篩查手段，液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）方法是國內(nèi)外指南推薦的檢測方法，可同時(shí)對兒茶酚胺6種代謝產(chǎn)物進(jìn)行定量（如表1），檢測限可達(dá)到pg級(jí)別。但是血液和尿液中的兒茶酚胺及代謝產(chǎn)物濃度極低，需要對樣本中的待測物進(jìn)行固相萃取，方可進(jìn)行檢測。
本試劑盒所含磁珠是根據(jù)兒茶酚胺及代謝產(chǎn)物等電點(diǎn)和極性分布的特點(diǎn)而專門設(shè)計(jì)的疏水弱陽離子平衡磁珠（PuriMag HLB-WCX），用于樣本中兒茶酚胺及代謝產(chǎn)物的特異性吸附，且具有高比表面積、高懸浮、快速磁分離的特點(diǎn)，特別適合大量樣本的快速前處理。
表1 兒茶酚胺代謝產(chǎn)物檢測項(xiàng)目和參考范圍
項(xiàng)目
縮寫
CAS
pKa
LogP*
參考范圍ng/ml
腎上腺素
E
51-43-4
9.69
-0.43
<0.111
去甲腎上腺素
NE
138-65-8
9.50
-0.68
0.07-0.75
多巴胺
DA
51-61-6
10.01
0.030
<0.03
甲氧基腎上腺素
MN
5001-33-2
10.05
-6.81E-04
<0.099
甲氧基去甲腎上腺素
NMN
97-31-4
9.99
-0.39
<0.165
3-甲氧酪胺
3-MT
554-92-9
10.39
0.53
<0.022
二、樣品前處理方法
（1）試劑配制
內(nèi)標(biāo)工作液：含有40 ng/mL甲氧基腎上腺素?d3 (MN?d3)、 40 ng/mL甲氧基去甲腎上腺素?d3 (NMN?d3)、40 ng/mL 3?甲氧酪胺?d4 (3?MT?d4)的0 .1 M的鹽酸水溶液。
淋洗液：甲醇或乙腈。
洗脫液：體積比為2:98的甲酸/乙腈混合液(且含10μg/mL的維生素C)。
（2）樣品處理流程
步驟1→磁珠的預(yù)處理：上下顛倒磁珠懸浮液，混合均勻后取 20 μL磁懸液到1 .5mL離心管中，加入200ul甲醇渦旋振蕩30S分散磁珠，磁分離，去除甲醇。加入200 μL純水。
步驟2→樣本的磁固相萃?。喝?0μL內(nèi)標(biāo)工作液和400μL樣本加入上述含200μL磁懸液的1 .5mL離心管中，渦旋振蕩30S分散磁珠，磁吸30S，去除上清液。
步驟3→淋洗：加入200μL純水，渦旋振蕩30S分散磁珠，磁吸30S，去除上清液。 加入200μL甲醇，渦旋振蕩30S分散磁珠，磁吸30S，去除上清液。
步驟4→洗脫：加入100μL洗脫液，渦旋振蕩30S分散磁珠，磁吸30S，取上清液上機(jī)檢測。
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