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固相萃取技術(shù)在樣品處理中的應(yīng)用

2016-10-2 21:37:30點(diǎn)擊:



  一、固相萃取技術(shù)簡介

  固相萃取(Solid Phase Extraction,簡稱SPE)技術(shù),發(fā)展于上世紀(jì)70年代,由于其具有高效、可靠、消耗試劑少等優(yōu)點(diǎn),在許多領(lǐng)域取代了傳統(tǒng)的液-液萃取而成為樣品前處理的有效手段。一些傳統(tǒng)的介紹SPE的書籍將其歸于一個(gè)液相色譜的原理,這其實(shí)是引起使用不當(dāng)?shù)闹饕从芍?。把SPE小柱看作一根液相色譜柱,不如把它看成單純的萃取劑更合適,因?yàn)椋阂合嗌V的重點(diǎn)在于分離,而SPE的重點(diǎn)在于萃取。 固相萃取技術(shù)在樣品處理中的作用分兩種:一是凈化,二是富集,這兩種作用可能同時(shí)存在。固體萃取和液-液萃取相比,其長處在于方便和消耗試劑少,短處在于批次間的重復(fù)性難以保證。出現(xiàn)這種情況的原因在于:液體試劑的重復(fù)性好,只要其純度可靠,不同年代的產(chǎn)品的物理化學(xué)性質(zhì)都是可靠的。而固體萃取劑就算保證了純度外,還存在著顆粒度的差異,外形的差異等液體試劑不存在的且難以衡量的因素,不同年代不同批號(hào)的萃取性質(zhì)可能會(huì)有較大的區(qū)別。從理論上和廠家(津楊濾材)宣傳來看,固相萃取應(yīng)該在色譜分析的前處理上得到很好的應(yīng)用:有機(jī)溶劑用得很少,可批量處理樣品,既可富集,又能除雜質(zhì),給人印象是前處理的革命性進(jìn)步。然而現(xiàn)實(shí)情況,起碼在國內(nèi),雖然推廣了多年,實(shí)際應(yīng)用還是相當(dāng)有限。SPE應(yīng)用得不廣,與我們的使用方式和期望有關(guān),也與它本身的局限有關(guān)。對于供應(yīng)商來說,從經(jīng)濟(jì)利益出發(fā),向來都是忽略固相萃取的局限與不足。固相萃取可以作為前處理手段的一個(gè)很好補(bǔ)充,但是在使用時(shí),一定要清醒知道到它的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn),注意因地制宜,揚(yáng)長避短。

  二、固相萃取的應(yīng)用優(yōu)勢

  在什么項(xiàng)目的前處理適合使用固相萃取技術(shù),即用固相萃取會(huì)比普通的溶劑萃取更理想,有以下幾種情況:

 ?。ㄒ唬?水中有機(jī)物的前處理 此類常規(guī)處理基本上是用與水不相溶的有機(jī)溶劑振蕩萃取,用固相萃取的優(yōu)勢在于:

 ?。?)量地重復(fù)前處理過程。 溶劑振蕩的操作一般只能要求到控制時(shí)間的程度,卻無法控制振蕩頻率,強(qiáng)度,動(dòng)作,我們知道,每個(gè)人的振蕩動(dòng)作是不同的,就是同一個(gè)人,也很難保證始終劃一的動(dòng)作。所以說,溶液萃取的動(dòng)作是不定量,不能重復(fù)的。而在應(yīng)用固相萃取時(shí),比較容易保持過柱和洗脫速度的均一和穩(wěn)定,因此,固相萃取的萃取過程是可以重復(fù),可定量的。

  (2)現(xiàn)場處理。水中有機(jī)物的分析有一個(gè)長期困擾我們的瓶頸。即有機(jī)物在池塘水庫等環(huán)境中能保持相對穩(wěn)定,但是一旦進(jìn)入采樣瓶這個(gè)小環(huán)境中,就會(huì)迅速發(fā)生變化,所以很多水的有機(jī)物分析方法要求即采即分析,最多不能超過4個(gè)小時(shí),可一般的情況是,從取水回到實(shí)驗(yàn)室的時(shí)間就遠(yuǎn)遠(yuǎn)不止4小時(shí)了,樣品發(fā)生了變化,分析結(jié)果的可靠性可想而知。 如果引入固相萃取技術(shù),由于其設(shè)備簡單,體積小,易于攜帶,完全可以做到在現(xiàn)場一邊采樣,一邊進(jìn)行前處理。采樣者帶回實(shí)驗(yàn)室的是固相萃取柱,而不是水樣。這樣就能保證我們處理的是真正成份穩(wěn)定的水樣。從實(shí)際應(yīng)用來說,在水的檢測中用固相萃取技術(shù)取代傳統(tǒng)液液萃取還有相當(dāng)?shù)墓ぷ餍枰?,目前尚不能完全取代,但是其發(fā)展的前景很值得看好。

 ?。?)有機(jī)試劑消耗量的減少在處理水樣時(shí),如果用固相萃取,則只需要在洗脫時(shí)用到有機(jī)溶劑,用量比傳統(tǒng)液液萃取要少數(shù)十倍以上。對于實(shí)驗(yàn)者的人身保護(hù)和環(huán)境保護(hù)有著積極的意義。

  (一)批量生物材料的藥物成分萃取 這是固相萃取在實(shí)際應(yīng)用中比較成功的范例,主要是指在醫(yī)院中檢測血樣和尿樣時(shí)的前處理工作,由于對藥物成份的吸附是固相萃取的優(yōu)勢,加上樣品單一,組成固定,在確定方法后很適合大規(guī)模批量的凈化操作。

 ?。ǘ┟庖哂H和固相萃取。萃取的理想狀態(tài)就是特異性富集或特異性排斥,可是不論是溶液萃取還是固相萃取,基本上是相似相溶的,最多做到"某一類"層次上的萃取,而無法達(dá)到"某一種"層次的萃取。在固相萃取柱的基礎(chǔ)上加上免疫親和技術(shù),可以利用其生物特異性選擇吸附,能夠達(dá)到近于理論的完美萃取。實(shí)際困難在于雖然其概念很好,但是由于技術(shù)難度相對較高,可供應(yīng)用的更少。

  三、固相萃取的應(yīng)用局限性

 ?。?)樣品局限性

  固相萃取不適于處理固體樣品。對于固體,必須將其先制備為液體形態(tài)才能進(jìn)行固相萃取操作,這一點(diǎn)就遠(yuǎn)不如液體萃取了。即使是液體樣品,固相萃取也有其額外的苛刻要求,即液體必須潔凈度高,不能有懸浮物或其它固體顆粒,否則會(huì)在柱前形成堵塞,無法繼續(xù)過柱及洗脫操作。所以固體樣品要制備成液體,液體樣品最好還要過濾。相比來說,溶劑萃取就不存在這個(gè)麻煩,稍臟點(diǎn)也影響不大。

 ?。?)結(jié)構(gòu)局限性

  固相萃取柱的結(jié)構(gòu)很簡單,除了塑料管,只有篩板和填料了。就這簡單的結(jié)構(gòu),帶來了便利,也帶來了與生俱來的矛盾,一些我們在用溶劑萃取時(shí)永遠(yuǎn)不會(huì)遇到的矛盾。

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