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遼寧省海洋水產(chǎn)科學(xué)研究院、遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院、大連生物技術(shù)研究所遼寧省蠶業(yè)科學(xué)研究所聯(lián)合發(fā)表磁珠法DNA提取論文如下：

李佩佩，等. 高通量DNA快速提取方法及其在柞蠶微孢子蟲分子診斷中的應(yīng)用, 蠶業(yè)科學(xué), 2019年05期

摘要：針對(duì)柞蠶微孢子蟲分子檢測(cè)受限于繁瑣的DNA提取而局限于實(shí)驗(yàn)室使用的瓶頸問題,以成本較低的堿裂解法結(jié)合磁珠抽提,建立了一種全程在96孔板上使用排槍操作的高通量DNA提取方法(HT提取),對(duì)比HT-凍融法和HT-SDS法2種裂解方法獲得的DNA在常規(guī)PCR與熒光定量PCR(qPCR)中的檢測(cè)下限,并進(jìn)行微粒子病篩查的應(yīng)用。結(jié)果表明,HT提取法與傳統(tǒng)方法相比,無繁瑣預(yù)處理,操作快速、通量高,污染低、抗干擾、提取DNA品質(zhì)好,主要耗材能重復(fù)使用,可自動(dòng)化,人力物力成本較低;HT-SDS法具有更穩(wěn)定的裂解效果,獲得的DNA用于常規(guī)PCR、qPCR檢測(cè)下限可達(dá)45和0045個(gè)/μL;HT-凍融法在常規(guī)PCR與qPCR中的檢測(cè)下限為45和045個(gè)/μL,而傳統(tǒng)抽提方法的常規(guī)PCR檢測(cè)下限僅為110個(gè)/μL。結(jié)合HT-SDS法和qPCR,對(duì)3 000個(gè)樣品進(jìn)行微粒子病篩查,結(jié)果顯示,其檢測(cè)靈敏度顯著高于現(xiàn)行鏡檢技術(shù),最高高出近11倍,且對(duì)低帶毒品種優(yōu)勢(shì)尤為顯著,有望實(shí)現(xiàn)在柞蠶種繭微粒子病檢疫及柞蠶種質(zhì)資源保護(hù)中的應(yīng)用,促進(jìn)柞蠶業(yè)發(fā)展。

基金：遼寧省科學(xué)事業(yè)公益研究基金項(xiàng)目(No.20180013)； 大連市高層次人才創(chuàng)新支持計(jì)劃項(xiàng)目(No.2018RQ59)； 遼寧省自然科學(xué)基金指導(dǎo)項(xiàng)目(No.20170540512,20170540513,201602418)； 遼寧省重大科技攻關(guān)項(xiàng)目(No.2014209001)；

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