實(shí)驗(yàn)常用試劑的配制方案
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1M Tris-HCl |
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□組份濃度 1M Tris-HCl （pH7.4，7.6，8.0）
□配制量 1L
□配置方法
（1）稱(chēng)量121.1g Tris置于1L燒杯中。
（2）加入約800mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?/span>
（3）按下表量加入濃鹽酸調(diào)節(jié)所需要的pH值。
| pH值 | 濃HCl |
| 7.4 | 約70mL |
| 7.6 | 約60mL |
| 8.0 | 約42mL |
（4）將溶解定容至1L。
（5）高溫高壓滅菌后，室溫保存。
注意：應(yīng)使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值，因?yàn)?/span>Tris溶液的pH值隨溫度的變化差很大，溫度每升高1℃，溶液的pH值大約降低0.03個(gè)單位。
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1.5 M Tris-HCl |
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□組份濃度 1.5M Tris-HCl （pH8.8）
□配制量 1L
□配置方法
（1）稱(chēng)取181.7g Tris置于1L燒杯中。
（2）加入約800mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?/span>
（3）用濃鹽酸調(diào)pH值至8.8。
（4）將溶液定容至1L。
（5）高溫高壓滅菌后，室溫保存。
注意：應(yīng)使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值，因?yàn)?/span>Tris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大，溫度每升高1℃，溶液的pH值大約降低0.03個(gè)單位。
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10×TE Buffer |
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□配制量 1L
□配置方法
（1）量取下列溶液，置于1L燒杯中。
1M Tris-HCl Buffer（pH7.4，7.6，8.0） 100mL
500 mM EDTA（pH8.0） 20mL
（2）向燒杯中加入約800mL的去離子水，均勻混合。
（3）將溶液定至1L后，高溫高壓滅菌。
（4）室溫保存。
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3M 醋酸鈉 |
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□配制量 100mL
□配置方法
（1）稱(chēng)取40.8g NaOAc?3H2O置于100～200mL燒杯中，加入約40mL的去離子水?dāng)嚢枞芙狻?/span>
（2）加入冰乙酸調(diào)節(jié)pH值至5.2。
（3）加入去離子水將溶液定容至100mL。
（4）高溫高壓滅菌后，室溫保存。
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PBS Buffer |
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□配制量 1L
□配置方法
（1）稱(chēng)量下列試劑，置于1L燒杯中。
| NaCl | 8g |
| KCl |
0.2g
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| Na2HPO4 |
1.42g
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| KH2PO4 | 0.27g |
2）向燒杯中加入約800 mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?/span>
（
（3）滴加HCl將pH值調(diào)節(jié)至7.4，然后加入去離子水將溶液定容至1L。
（4）高溫高壓滅菌后，室溫保存。
注意：上述PBS Buffer中無(wú)二價(jià)陽(yáng)離子，如需要，可在配方中補(bǔ)充1mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。
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10 M醋酸銨 |
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□組份濃度 10 M 醋酸銨
□配制量 100mL
□配置方法
（1）稱(chēng)量77.1g醋酸銨置于100～200 mL燒杯中，加入約30 mL的去離子水?dāng)嚢枞芙狻?/span>
（2）加去離子水將溶液定容至100mL。
（3）使用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌。
（4）密封瓶口于室溫保存。
注意：醋酸銨受熱易分解，所以不能高溫高壓滅菌。
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10％（W/V）SDS |
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□組份濃度 10％（W/V）SDS
□配制量 100mL
□配置方法
（1）稱(chēng)量10g高純度的SDS置于100～200mL燒杯中，加入約80mL的去離子水，68℃加熱溶解。
（2） 滴加數(shù)滴濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至7.2。
（3）將溶液定容至100mL后，室溫保存。
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2N NaOH |
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□組份濃度 2N NaOH
□配制量 100mL
□配置方法
（1）量取80mL去離子水置于100～200mL塑料燒杯中（NaOH溶解過(guò)程中大量放熱，有可能使玻璃燒杯炸裂）。
（2）稱(chēng)取8g NaOH小心地逐漸加入到燒杯中，邊加邊攪拌。
（3）待NaOH完全溶解后，用去離子水將溶液體積定容至100mL。
（4）將溶液轉(zhuǎn)移至塑料容器中后，室溫保存。
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