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抗原/抗體法快速檢測新型冠狀病毒膠體金試紙?jiān)?/h3>

來源:生物磁珠專家 2020-4-11 13:44:46??????點(diǎn)擊:



上面介紹的是檢測抗原的 雙抗體夾心法,另外一種是檢測患者血液里特異性針對新型冠狀病毒的IgM抗體。這種就是IgM捕捉法的膠體金試紙。

首先要了解人體抗體應(yīng)答的規(guī)律——


人體在接觸外來抗原的時(shí)候,最早產(chǎn)生的抗體是IgM(Ig就是Immunoglobulin/免疫球蛋白的意思),但是也需要是機(jī)體感受病原刺激大約一周以后才出現(xiàn),所以在檢測時(shí)間窗口上來說,不如核酸檢測來的快。

IgM實(shí)際上就是B淋巴細(xì)胞表面的B細(xì)胞受體(BCR)的分泌形式,這是在人體發(fā)育成熟的過程中預(yù)先備好的巡邏兵,但是相當(dāng)于是新兵蛋子,還沒真正見過敵人。IgM在識(shí)別抗原以后,產(chǎn)生這些IgM的B細(xì)胞會(huì)進(jìn)入淋巴結(jié),在這里被已經(jīng)分析好敵情的抗原提呈細(xì)胞APC(主要是樹突狀細(xì)胞DC)和輔助性T淋巴細(xì)胞的幫助訓(xùn)練下,殺敵本領(lǐng)有的質(zhì)的飛躍,B細(xì)胞自己也有了覺悟,出現(xiàn)了進(jìn)化,相當(dāng)于Civ里一級戰(zhàn)士變成了6級戰(zhàn)士,進(jìn)化的結(jié)果就是從B細(xì)胞分化為漿細(xì)胞,漿細(xì)胞可以大量分泌抗體,而且這些抗體的親和力比IgM會(huì)高很多,這就是IgG。IgG會(huì)在機(jī)體內(nèi)存在很長時(shí)間,有的甚至可以存在幾十年。但是IgM只在病原體剛來的時(shí)候會(huì)出現(xiàn),持續(xù)時(shí)間大約一周,所以,可以用IgM來反應(yīng)機(jī)體是不是處于急性感染狀態(tài)。

在了解機(jī)體抗體應(yīng)答規(guī)律之后,我們就知道了,如果能檢測到人體血液里存在針對新型冠狀病毒的IgM抗體,那么就可以下臨床診斷了。


那IgM捕捉法的膠體金試紙的原理也就很好理解了。

試紙的布局還是一樣的,只不過每一處的東西不一樣了——

樣品墊上滴加的是血液樣本(血清),這里面可能有針對新型冠狀病毒的IgM抗體,在結(jié)合墊處預(yù)留的金標(biāo)的抗原,而不是金標(biāo)的抗體。這個(gè)抗原就是新型冠狀病毒的一個(gè)蛋白(體外重組表達(dá)出來的)。這樣IgM就會(huì)結(jié)合這個(gè)抗原,并且把膠體金帶上了。檢測線的位置放的是針對人IgM的抗體,這樣,如果血液樣本里有IgM,就會(huì)被這個(gè)地方的抗體截留一部分,但是如果這些IgM不能識(shí)別結(jié)合墊處的金標(biāo)冠狀病毒抗原,那么檢測線也不會(huì)顯色。所以這是檢測線的原理。


對于質(zhì)控線來說,這里留的是針對結(jié)合墊處的金標(biāo)抗原的實(shí)驗(yàn)室制備的抗體,所以,不管樣本里有沒有特異性的IgM,只要加了流動(dòng)介質(zhì),結(jié)合墊處的金標(biāo)抗原都會(huì)被這個(gè)地方所捕獲,也就是質(zhì)控線一定會(huì)顯色。 那這個(gè)質(zhì)控就和上面一樣簡單了,大約15分鐘,就能根據(jù)兩條線的顯色情況下判斷了。

原理介紹完了,膠體金的最大優(yōu)點(diǎn)就是快速,方便。

但是缺點(diǎn)也很明顯——通量不高,另外試紙的準(zhǔn)確性高度依賴于抗體的特異性,如果抗體質(zhì)量不好,那很容易有交叉反應(yīng),造成誤判。另外,IgM產(chǎn)生的時(shí)間要晚于病毒復(fù)制的時(shí)間,所以檢測窗口也不如核酸檢測。


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