【產(chǎn)品介紹】
磁珠法質(zhì)粒DNA大量抽提試劑盒是普睿邁格生物科技有限公司最新研制的一種細菌質(zhì)粒DNA大量抽提試劑盒。本產(chǎn)品將磁性納米分離技術(shù)和細菌細胞的SDS堿裂解法結(jié)合可以簡單、快速、低成本的從重組大腸桿菌培養(yǎng)物中提取高質(zhì)量的質(zhì)粒DNA。在離心力的作用下細胞碎片和SDS復(fù)合物沉淀下來。在一定的條件下磁珠能很好的吸附存在于上清中的質(zhì)粒DNA，其他雜質(zhì)如蛋白質(zhì)、鹽離子等通過洗滌被除去。當(dāng)條件改變時，磁珠釋放吸附的質(zhì)粒DNA?？稍?5分鐘內(nèi)從100-200 ml的Luria Broth (LB)培養(yǎng)基中回收出多達1.5 mg的質(zhì)粒DNA。請注意，實際得率和最佳的培養(yǎng)物體積取決于質(zhì)粒和培養(yǎng)基。由本試劑盒抽提得到的質(zhì)粒純度高，OD260/OD280比值一般為1.7~1.9之間，OD260/OD230比值大于2.0，可直接用于轉(zhuǎn)化、DNA測序、PCR、基于PCR的突變、體外轉(zhuǎn)錄和酶切等后續(xù)實驗。
【特點】
l 對于高拷貝質(zhì)粒，從200 ml過夜培養(yǎng)菌液（OD600 = 2.0）中可獲得超過1.5 mg的質(zhì)粒DNA；
l 與同類產(chǎn)品相比，提取效率更高，獲得質(zhì)粒的純度更高；
l 與柱式法相比，可大大減少離心次數(shù)，獲得完整性更好的質(zhì)粒；
l 可以同時處理多個樣品，實現(xiàn)質(zhì)粒提取的高通量化和自動化。
【保存方法及注意事項】
l 請將試劑盒中的PuriMag Beads和RNase A置于2-8℃保存，其余試劑室溫保存，有效期詳見包裝。
l 嚴禁冰凍、離心。冰凍、離心可能會對磁珠造成不可逆的損害。
l 磁珠長期放置后會聚集成團，從而使磁珠表面積減小，降低樣品回收得率，使用前一定要渦旋振蕩徹底混勻磁珠（通常需渦旋振蕩20秒）。
【試劑盒組成】
組分
5次
保存
Resuspension solution
100 ml
2-8℃
Lysis buffer
Neutralization solution
Wash buffer
75%乙醇（用戶自備）
Elution buffer
PuriMag bead
10 ml
RNase A
異丙醇
用戶自備
常溫
DNA濃度及純度檢測 ：（1）得到的基因組DNA片段大小與樣品保存時間、操作過程中剪切力等因素有關(guān)，所得DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度和純度。 （2）DNA應(yīng)在OD260處有顯著吸收峰，OD260=1相當(dāng)于大約50ng/ul雙鏈DNA，40ng/ul單鏈DNA。OD260/OD280比值應(yīng)為1.7~1.9，如果洗脫時使用去離子水，比值會偏低，因為pH和離子會影響吸光度，并不表示純度低。
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